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经验分享 | 多年 CCK-8 经验总结请收好,这些坑不要再跳了

发布于 2022-04-28 · 浏览 2830 · IP 浙江浙江
这个帖子发布于 3 年零 4 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

在细胞培养实验过程中,很多科研汪都明白试剂盒带来的巨大便利,MTT 花 4 小时才能得到的结果用 CCK-8 只需 1 小时。


不仅如此,CCK-8 对细胞的毒性极小,完全可以测完细胞增殖或药物毒性后再继续用细胞进行下游实验。下面就来为大家介绍一下 CCK-8 的具体情况。


👇 本文涉及实验汇总建议先收藏(点击文字即可查看)

👉细胞毒性分析(CCK-8 法)

👉 细胞增殖分析(CCK-8 法)

👉 基于 MTT 的细胞毒性实验

👉 细胞增殖检测:MTT法



细胞毒性检测

实验对比


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CCK-8

注意事项合集


1. 第一次做实验时,建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入 CCK-8 试剂后的培养时间。

2. 接种时注意细胞悬液一定要混匀,以避免细胞沉淀下来,导致每孔中的细胞数量不一致。

3. 培养板周围一圈孔培养液容易挥发,为减少误差,建议培养板周围的四边每孔只加培养基。

4. 建议采用多通道移液器,减少平行孔间的误差,加 CCK-8 时,建议斜贴着培养板壁加,不要插到培养基液面下加,容易产生气泡,干扰 OD 值。

5. CCK-8 反复冻融会增加背景值,干扰实验测定。


👇更多实验经验技巧点击下方文字即可查看:

👉 CCK8 实验心得

👉 CCK8 新手村:实验心得整理

👉 CCK-8 替代 MTT?


CCK-8 

常见问题解答


Q:CCK 的保存和稳定性如何?

A:CCK 稳定性高,避光条件 -20℃ 有效期 2 年,4℃ 有效期 1 年。经常使用建议 4℃ 保存,避免反复冻融。CCK 正常颜色为粉红色,若颜色发生明显偏差,质量可能有发生变化。


Q:在实验中 OD 值太高,怎么解决?

A:可以缩短加入 CCK-8 后的培养时间。例如:可以把加入 CCK-8 试剂后的培养时间由 2 小时缩短为 1 小时。此外,可适当减少细胞的数量。


Q:如果 OD 值太低,怎么解决?

A:可以采取 2 个办法:1、适当增加细胞数量;2、延长加入 CCK-8 试剂后的反应时间。


如果你是师兄师姐,也欢迎把本篇文章分享给师弟师妹们!

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最后编辑于 2022-05-12 · 浏览 2830

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