Trap的染色方法，实验步骤，注意事项。

工作液配置步骤：

⦁ 取B液50ul与C液50ul在离心管混合均匀，为副品红溶液。

⦁ 在上述100ul副品红溶液中加入100ul D溶液，混合均匀。

⦁ 取A液1.8ml于上述混合液中，充分混匀。

⦁ 混匀后经针式滤器过滤，则得到trap工作液。

备注：务必按照所属顺序配制工作液。注意工作液为现配现用。

染色步骤：

1. 石蜡切片常规脱蜡至水（冰冻切片省略这步）

2. 切片于纯水洗5分钟

3. 用组化笔在切片组织上画圈后，置于盛有纯水的湿盒中，用纯水37℃孵育2h。

4. 倒去组织上纯水后，切片重新放入湿盒，滴加现配过滤好的trap工作液完全覆盖于切片组织上，放于37℃烤箱避光染色20-30 min。

5. 倾去染液，水轻洗玻片

6. Mayer苏木素染液液滴染（浸染）1-2min，水洗。（此步骤为染核，可自选）

7. 切片经3缸无水乙醇，每缸5min  → 直接放入 2缸二甲苯，每缸5min透明后，滴加中性树胶封片剂封片。

结果判读：破骨细胞呈酒红色，细胞核呈蓝色。

注意事项：D染液存放温度为-20℃，trap工作液为现配现用，提前估计好每次用量。

武汉博尔夫有染色试剂盒，实验也可接。官网有详细染色步骤可以参考。