单人CLP操作流程
作为一只没钱没人又经常要在不同的地点做CLP造模的单身狗
操作要点:
(1)全程兼职主刀和麻醉,只用异氟烷麻醉即可,有麻醉机最好,没有麻醉机临时用50毫升离心管加一团脱脂棉代替挥发器也行,但是经常出现麻醉程度没注意到导致术中醒来或者麻醉过度的问题,即使是老手也经常有5-10%的翻车率。
(2)提前腹部剪毛,清理手术野,用电推子剪就行,期间异氟烷浅麻醉两三分钟避免扰动即可。
(3)外层皮肤伤口夹固定可以大大省时省力还能避免术后腹腔注射小鼠挣扎导致伤口崩裂的问题。如果留长期(5-7天及以上)。模型记得三天就能拆伤口夹了。那个店子里卖的拆架子的玩意就是垃圾,用两把止血钳比那个更省事也更容易。
(4)盲肠结扎部位:以盲肠供血动脉第二分支为终点界,远端为起点,轻度结扎10%,中度50%,重度70%。我的经验比那种1cm模型更典型些。结扎之前记得把内容物(翔)往回挤一挤捋一捋,让结扎远端保持一种适中的压力,避免结扎后变成个小喷粪炸弹,造成人工性重度CLP。
(5)穿孔:一般用10毫升注射器针就行(相当于21G针,外径0.8mm),记得穿透的时候不要手抖,要一次穿透,穿透2-3次。在2-3个孔挤出0.5mm2的翔就可以了。然后轻柔回纳到腹腔里面一侧位置,别放中间,不然新手很容易缝合的时候把它和伤口缝在一起。
(6)切口及缝合:切口位置,小鼠双侧肋弓下缘到大腿上缘之间大概0.8-1.0cm,前正中切口,剪开的时候尽量干净利落,又平又直最好。内层腹直肌间有白膜,从白膜剪开一滴血都不会流,剪开皮肤后提起两边撕开一下就能看到。一个合格的CLP模型或者脓毒性休克模型就是应该做到滴血不留的完成造模,完全排除失血性休克因素。
(7)术后复苏:液体要预热到起码20度以上,我用的是盐水袋子加贴暖宝宝的方法,复苏量1毫升每只,达到皮下就行。
(8)注意卫生:每只开始前腹部碘伏消毒,器械用酒精棉球消毒,尽量不要固定动物,影响效率,动物也不舒服。
(9)正常手术时间:用内层缝合,外层伤口夹,8分钟一只;都用缝合,12分钟一只。手术拖得太久很容易出现水分过度挥发导致内脏容易划伤和失温。注意术中要用电热毯,开到中度保持温暖即可,过高容易烫伤,过低没效果。
(10)自制便携式器械包括台灯,泡沫板,加热垫(是影响术中死亡率的关键因素)老三样。DIY器械:两把眼科小弯镊(一把磨尖用于提起皮肤或白膜,一把圆头,便于开腹后翻找盲肠),一把足够锋利的眼科小直剪,一把伤口夹闭合器,每只小鼠3个夹子。总之怎么方便怎么来。
大家多多加油😊






视频不知道在搞什么,一直传不上去。罢了,我愿公之于天下,奈何天下不收。
最后编辑于 2021-12-19 · 浏览 1573