诱导B细胞永生化的一点经验
yj1984ren +5 丁当这个帖子发布于 3 年零 350 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
对经典老贴： https://www.dxy.cn/bbs/newweb/pc/post/7574330 的一点补充
我最近也在做B细胞永生化，参考了上述方案以及pubmed上的论文，有一点小经验想分享一下。一种增加EBV滴度的方法：使用200ng/ml PMA/TPA刺激B95-8细胞12h后，PBS洗3遍，重新加入完全1640培养基，培养96h，收集上清并使用0.2μm滤网过滤后-80℃冻存备用。原理是在基础状态下EBV是latency，PMA能刺激其进入productive lytic cycle，详见论文
https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/11991990/
。这个方法优于饥饿法，也有SCI文献支持，有兴趣可以去找一下。我实际也做了一下对比，相比饥饿法（我饥饿了12d），PMA刺激法产生的EBV，转化健康人PBMC的效果更佳。局限在于我没有重复实验，也没有设置生物学重复，仅处理了一例PBMC样本（我自己的血
），现在仅转化第3天，后续会更新。效果见图，仅供参考，欢迎批评指正~
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