【质粒介绍】分解篇4-蛋白检测标签

这一篇为大家讲解的是蛋白标签（protein tag）中的蛋白检测标签。

分子生物学经常用到蛋白标签，因为在检测过程中，经常碰到目的蛋白的抗体不易买到的情况，这时使用相应的蛋白标签可以方便达到检测的效果，常用的蛋白标签主要有以下几个。

Flag标签蛋白

8个氨基酸的亲水性多肽编码的蛋白，同时载体中构建的Kozak序列使得带有FLAG的融合蛋白在真核表达系统中表达效率更高。FLAG作为标签蛋白，其融合表达目的蛋白后具有以下优点：

FLAG作为融合表达标签，其通常不会与目的蛋白相互作用并且通常不会影响目的蛋白的功能、性质，这样就有利用研究人员对融合蛋白进行下游研究。

融合FLAG的目的蛋白，可以直接通过FLAG进行亲和层析，此层析为非变性纯化，可以纯化有活性的融合蛋白，并且纯化效率高。

FLAG作为标签蛋白，其可以被抗FLAG的抗体识别，这样就方便通过Western Blot、ELISA等方法对含有FLAG的融合蛋白进行检测、鉴定。

融合在N端的FLAG，其可以被肠激酶切除(DDDK)，从而得到特异的目的蛋白。因此现FLAG标签已广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域。

参考图谱

HA标签蛋白

源于流感病毒的红细胞凝集素表面抗原决定簇，含有高比例的带电残基的9个氨基酸，对外源靶蛋白的空间结构影响小, 容易构建成标签蛋白融合到N端或者C端。易于用Anti-HA抗体检测和ELISA检测。

参考图谱

c-Myc标签蛋白

一个含11个氨基酸的小标签，意味着它不太可能干扰（或增强）蛋白质折叠，可置于蛋白质的N端和C端。C-Myc tag已成功应用在 Western-blot杂交技术、免疫沉淀和流式细胞计量术中, 可用于检测重组蛋白质在靶细胞中的表达。

参考图谱

V5标签

来源于副粘病毒SV的P/V蛋白的95-108位氨基酸。

HSV标签（单纯疱疹病毒）

来源于糖蛋白D前体包膜蛋白并且短，所以它不太可能干扰蛋白质结构或功能。

看完了吗？

好，那么本期推送的两篇

蛋白纯化标签与蛋白检测标签的内容

就先讲到这里

下一周将发布

【质粒介绍】系列的最后两篇：

【质粒介绍】分解篇5-蛋白荧光标签

【质粒介绍】分解篇6-载体推荐

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