第一次做WB需要准备哪些？给像我一样科研小白做个基础的建议吧，

第一次做WB需要准备哪些

给像我一样科研小白做个基础的建议吧，第一次做实验，肯定很多时候很懵，甚至不知道该准备哪些试剂，用自己浅薄的知识列个WB实验需要的相关试剂耗材清单吧，给需要的园友。1、WB首先是提取蛋白：细胞蛋白的话，一般6孔板细胞长满差不多够了，细胞裂解液RIPA，磷酸酶抑制剂，PMSF(苯甲基磺酰氟（phenylmethylsulfonyl fluoride）又名氟化磺酰甲苯，分子式C7H7FO2S，白色结晶性粉末。不易溶于水，易溶于甲醇、乙醇和异丙醇。它是一种非有机磷类的有机化合物，是丝氨酸蛋白酶的抑制剂），根据自己实验目的决定是否使用磷酸酶抑制剂。

2、蛋白提取后--蛋白定量---BCA试剂盒

3、蛋白样品制备需要：RIPA、Loading buffer

4、胶：我们买的雅酶的胶，配起来很方便，根据自己蛋白分子量决定买不同浓度的胶；上样需要准备：目的蛋白，根据自己蛋白分子量选择具体大小的目的蛋白

5、PVDF膜：根据蛋白分子量大小决定购买0.22还是0.45um的

6、甲醇（活化PVDF膜、配备电转液需要）准备300ml、电泳液、电转液、TBST\脱脂奶粉（封闭、配抗体时候需要）夹膜的小镊子、圆珠笔（标记样品）、目的蛋白一抗、、还有内参蛋白抗体（常用的有GAPDH、Tubulin、b-actin）、二抗

7、发光液

以上就是需要准备的各种试剂了，给和我一样首次做不知道买什么的小伙伴一个参考