【求助】构建共表达载体时如何获取及添加RBS(核糖体结合位点)
我现在有三段基因想要在同一载体上共表达(表达出三个蛋白,不是融合表达),导师说如果每个基因前都加一个同样的启动子(我用的是硫链丝菌素诱导型启动子)的话容易发生载体内部的同源交换,所以想要只用一个启动子共表达这三个基因(即多顺反子表达载体),在第二第三个基因前加核糖体结合位点(RBS),我的设想是:
启动子--基因1--RBS--基因2--RBS--基因3--终止子
不知道这种设计是否合理?一直没找到相关的文献,最关键的问题是不知道要添加的RBS序列从哪里找?是用软件预测吗?
有没有用过这样方法的大神,求一个较为详细的攻略,万分感谢!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1569