细胞反复污染的原因排查

大家好，从6月15号细胞开始污染到现在快2个月了，中间一一排查了各种因素：试剂、耗材、操作和环境，都没有很确定到底哪个方出了问题。直到7月25日在公司重新买了一株新细胞和配套的完全培养基，一直养到8月10日都没问题（说明可以排除耗材、操作和环境的因素）。但在10号那天用完了公司的完全培养基，我就用自己的基础DMEM培养基、血清和三抗来配制，因为还是不放心，所以就对其都一一做了空培，没想到第二天细胞就出现了污染，培养瓶里肉眼可见呈细沙状白色混浊，镜下也是一片混浊，紧接着我又做了结晶紫染色后在油镜下观察，发现有许多小圆形颗粒，应该是球菌污染（见下图）。

第三天（12号）镜下观察做空培的基础培养基和三抗没有任何异常，但完全培养基污染了（和之前培养瓶里的污染一样），血清出现了如图中的许多杂质样小颗粒物质，但不混浊，高倍镜下也没见到会动的东西（见下图）。

所以我现在有3个问题：

一是不知道镜下小颗粒是血清本身带有的营养物质还是细菌污染了？（这管血清是7月20日从公司新买进口的BI血清，买来就分装到50ml离心管里了，分装都很小心应该不至于污染）

二是如果真是血清污染了，我想通过0.22um滤膜的过滤器过滤一下能直接用吗？

三是空培最长要做多久才能完全排除污染？因为现在基础培养基和三抗还没有异常，不知道是时间还没到还是真的没有污染。

最近实在是被污染搞怕了，做了快一年的实验竟然还解决不了细胞污染的问题，对自己也产生了怀疑，甚至对实验产生了抵触逃避心理，希望能和大家一起讨论学习一下如何解决这个污染问题，万分感谢！