小鼠乳腺癌4T1-luc细胞实验肺转移模型构建

小鼠肺转移癌模型是科研实验中比较常用的并且经济的动物模型,理想肺转移模型的建立可以为研究疾病发生的机制及药物作用效果奠定基础。

动物选择

一般选择4-6周龄BALB/c或者C57BL/6小鼠,需要提前到饲养环境中适应1周。

接种部位与接种细胞量

通过尾静脉注射,细胞量一般是1-5*106个/200ul。也可以通过皮下注射相同的细胞量,不同的细胞系的接种量略有差别。

尾静脉注射操作

细胞系的选择与状态调整

目前实验室已经验证小鼠乳腺癌细胞系(4T1)和小鼠肺癌细胞(LLC)能够成功构建肺转移癌模型,细胞状态调整到对数生长期,失败率极低。其他种类的细胞规律行不强,还有待验证。

模型转移周期

尾静脉注射转移的周期大概是2-3周,皮下注射转移的周期会增加至3-4周。

如何判断模型是否构建成功?

 活体成像

1

尾静脉或者皮下接种稳转luciferase荧光素酶的可以明显观察到荧光信号

 尾静脉注射4T1-luc细胞构建2周

尾静脉注射4T1-luc细胞构建4周 

 病理剖检

2

  在肺组织的表面可以明显看到癌细胞转移灶

正常的肺组织

 癌细胞肺转移灶

 HE染色

3

 正常的肺组织染色结构清晰,肺转移癌组织会被瘤细胞破坏原有结构

 正常的肺组织染色

肺转移癌组织染色