HepaRG细胞系分化流程中的操作
现在正用HepaRG细胞系来进行CYP诱导相关的化合物评估。现有的HepaRG分化流程基本上是两步法,即细胞先在生长培养基增殖14天后,换诱导培养基再处理14 天。Biopredict公司特别注明了在生长培养基的14天内,细胞不可以进行传代操作,但是未有明确的说明,在加入分化培养基前是否需要进行细胞传代,14天后的HepaRG细胞已经堆积生长了。考虑到分化也需要空间,就把细胞进行了传代,但是加入2%的分化培养基后,细胞仍会增殖,只是速度略慢,这时候出现了肝上皮样的细胞。由于加入分化培养基后细胞又长满了,再次进行了传代操作,发现肝上皮样细胞减少了不少,且细胞倾向于增殖,不形成肝上皮样的细胞,所以HepaRG在加入分化培养基的时候可以进行传代吗?传代的密度是怎么样子的?