要点梳理II新冠病毒核酸检测实验室建设及运行管理要求

前言

当下，全国二级及以上医院都配备有新冠核酸检测实验室，甚至一些乡镇医院也有设置。多数基层的检验人都是在当下背景中催长起来的，因此，虽然对于新冠病毒核酸检测项目的应用熟悉，但是对于PCR实验室的运行管理尚不能完全掌握。小六就以往工作经历中积累到的经验，分享给大家，希望对大家有所帮助。

注：大家在实际应用中要遵循各自省份的具体要求进行，各省略有不同。

一、新冠PCR实验室设计建设要点

#01开展新冠病毒核酸检测实验室的条件：

同时具备二级生物安全实验室和临床基因扩增检验实验室资质。

#02新冠病毒核酸实验室设计及建设依据：

（1）实验室设置

遵循“三十二字”基本原则：各区独立、注意风向、因地制宜、方便工作、工作有序、互不干扰、防止污染、报告及时。

“个体化”实验室应根据自己的检验项目、所采用的检测技术平台和工作量来决定分区的多少及各区域的空间大小。

※ 实验室必需要有独立分区，但是，分区数量不是固定的，可以根据仪器功能设2个、3或者4个功能分区

※ 实验区必需设有缓冲区，缓冲区是阻隔空气交换的重要措施。

但是，PCR专用走廊不是必需的。

关于“PCR专用走廊”的作用：主要是将实验室与其他区域分开。这种分开在控制污染方面，并没有多少积极作用。相反，更容易导致交叉污染。因此，应优先设置缓冲区。面积不足时不设走廊，当工作面积足够时可设走廊。

（2）实验室建设

①二级生物安全实验室的基本要求：

P2实验室&P2+实验室在设置中的区别

②实验室内气流组织与压力要求：

※ 实验室的空气流向必须严格按照：试剂准备区→标本制备区→扩增区→扩增产物分析区空气压力逐渐递减方式进行，防止扩增产物顺空气气流进入扩增前的区域。

※ 空气洁净级别不同的相邻房间之间的静压差应大于 5 帕，应配备监测静压差的设备，并定期监控。

※ 通过控制进风量与排风量达到压力效果。

※ 实验区内进排风口设置要求“上送下排”“斜对角”。

※ 各区通风换气：>10次/小时（P2+>12次/小时）。

③实验室内洗手池设计、冲淋洗眼装置、生物安全柜、消毒灭菌设备的要求：

二、新冠PCR实验室人员要求

#01检验人员要求：

具备临床检验技术资格证+PCR上岗证

#02生物安全员要求：

具备生物安全培训证书（证书一般4年左右效期）

#03高压锅作业人员要求：

具备特种设备人员作业证（4年换证）

三、新冠PCR实验室文件体系

《PCR实验室作业指导书》（包括相关程序文件和标准操作SOP）、《生物安全手册》及相关记录表格

四、新冠PCR实验室运行管理要求

#01人员管理：《人员档案》

个人技术档案：应反映个人素质和能力，包括教育背景、专业资格（相应医学职称）、培训、检验及能力记录以及职业危害暴露记录和免疫状态记录。

※ 人员能力评估方式：培训考核（理论知识+实践操作）

培训内容：例如，SOP文件学习、实验室室内质控培训、生物安全防护培训、如何避免假阳性假阴性等。

#02仪器设备管理：《仪器设备档案》

※ 仪器设备上应用设备标识及校准标识

※ 仪器设备按照SOP进行使用、维护保养（SOP按照说明书进行编写）

※ 填写《仪器使用、维护记录表》

※ 应有完整的《仪器校准报告》

#03试剂、耗材管理：

※ 试剂验收、耗材质检：参照相关SOP文件要求进行验收、质检并记录。

※ 试剂储存：试剂按规定在试剂准备区储存和配制，储存条件参照试剂说明书要求。

※ 自制试剂：要有配制的SOP，并有规范化标识。

#04标本管理：

※ 标本的唯一编码维持在检验全过程，可溯源；

※ 标本接收合格性严格把关（标本的拒收参照相关SOP文件并做好记录）；

※ 标本采集、运送和保存要规范（相关SOP与记录表格）

#05SOP文件要求：

※ 具可操作性；

※ 实际操作与SOP文件相吻合。

#06记录类管理：

※ 表格设置应有实用性（要有实验流程记录表）；

※ 检测过程中的数据应完整记录；

※ 所有记录表格应正确、整洁；

※ 记录保存完整，并按要求归档。

#07性能验证要求：

新建方法或更换试剂时性能验证要规范。

※ 选择标准品/质控品，确认可行性方案。

※ “在用于临床标本检测前，实验室应对由提取试剂、提取仪、扩增试剂、扩增仪等组成检测系统进行必要的性能验证，性能指标包括但不限于精密度（至少要有重复性）和最低检测限。建议选用高灵敏的试剂（检测限 ≤500 拷贝/ml）。”

#08质量控制要求：

室内质控+室间质评（通过对室内质控和室间质评结果的分析，可以帮助实验室及时查找可能存在的质量问题）

※ “实验室应按照《国家卫生健康委办公厅关于医疗机构开展新型冠状病毒核酸检测有关要求的通知》（国卫办医函〔2020〕53 号）要求规范开展室内质控。每批检测至少有 1 份弱阳性质控品（第三方质控品，通常为检出限的 1.5-3 倍）、3 份阴性质控品（生理盐水）。质控品随机放在临床标本中，参与从提取到扩增的全过程。”

#09操作过程要求：

※ 规范化操作；

※ 试剂存放及配置、移液器的匹配和使用、实验中的防污染等。

#10报告单要求：

※ 基本信息完整（采集、接收、检测、报告时间精确到分）；

※ 除通用要求外，适用时，分子诊断报告还应有结果解释、方法学灵敏度说明及方法学局限性、方法的检出范围（指检出的突变）、进一步检测的建议、相关资讯人员及联系方式等

#11实验室生物安全管理要求：

※ 各区专用清洁工具

※  排风装置及生物安全柜定期更换滤膜

※  实验室内设施、设备满足工作要求

※ 实验室日常清洁消毒（相关SOP并做好记录）

※ 对实验室进出人员进行授权管理

※  消毒液按照使用要求进行配制和管理（相关SOP并做好监测记录和使用记录）

※  实验室出口有消毒设施

※  废弃物的处理（相关SOP）

#12实验室抱怨管理：

※  对抱怨认识要充分，有完善的SOP文件；

※  对抱怨的记录、分析要详细。