实验室生物安全知识系列②：压力蒸汽灭菌器的使用规范

压力蒸汽灭菌器作为BSL-2实验室必备的生物安全设备之一，在实验室中承担着生物安全一级防护屏障的职责。因此，作为一名合格的实验室工作人员，我们理应具备相关专业知识和技能来正确操作和使用它。

一、人员要求

按照国家质检总局《特种设备作业人员监督管理办法》要求：

1.特种设备使用单位应当聘（雇）用取得《特种设备作业人员证》的人员从事相关管理和作业工作，并对作业人员进行严格管理。

2.《特种设备作业人员证》每 4 年复审一次。持证人员应当在复审期届满3个月前，向发证部门提出复审申请。

二、压力蒸汽灭菌器分类

根据排放冷空气的方式和程度不同，分为下排气式压力蒸汽灭菌器和预排气压力蒸汽灭菌器两大类。

根据灭菌时间的长短，压力蒸汽灭菌程序包括常规压力蒸汽灭菌程序和快速压力蒸汽灭菌程序。

1、下排气式压力蒸汽灭菌器

下排气压力蒸汽灭菌器包括手提式压力蒸汽灭菌器和卧式压力蒸汽灭菌器等，灭菌程序一般包括前排气、灭菌、后排气和干燥等过程，具体操作方法遵循生产厂家的使用说明或指导手册。

灭菌器的灭菌参数一般为温度121℃，压力102.9 kPa，器械灭菌时间20min，敷料灭菌时间30min。

说明：

目前大部分新冠实验室采用的是这类压力蒸汽灭菌器，灭菌参数一般设为为121℃，压力102.9 kPa，30min。

具体操作步骤、常规保养和检查措施，要遵循生产厂家的使用说明或指导手册。

2、预排气压力蒸汽灭菌器

灭菌器的灭菌程序一般包括3次以上的预真空和充气等脉冲排气、灭菌、后排气和干燥等过程，具体操作方法遵循生产厂家的使用说明或指导手册。

灭菌器的灭菌参数一般为温度132℃~134℃，压力205.8 kPa，灭菌时间4min。

3、快速压力蒸汽灭菌

快速压力蒸汽灭菌包括下排气、正压排气和预排气压力蒸汽灭菌。其灭菌参数如时间和温度由灭菌器性质、灭菌物品材料性质（带孔和不带孔）、是否裸露而定，见表。 具体操作方法遵循生产厂家的使用说明或指导手册 。

三、适应范围

适用于对耐热、耐湿诊疗器械、器具、物品的灭菌。

下排气压力蒸汽灭菌器还适用于液体的灭菌；

快速压力蒸汽灭菌器适用于裸露的耐热、耐湿诊疗器械、器具和物品的灭菌。

压力蒸汽灭菌器不适用与油类和粉剂的灭菌。

四、灭菌效果监测

（一）化学监测法

1.方法：

（1）化学指示管(卡)监测方法: 将既能指示蒸汽温度，又能指示温度持续时间的化学指示管(卡) 放入被灭菌物品的中央，经一个灭菌周期后，取出指示管(卡)，根据其颜色及性状的改变判断是否达到 灭菌条件。

（2）化学指示胶带监测法: 将化学指示胶带粘贴于每一待灭菌物品包外，经一个灭菌周期后，观察 其颜色的改变，以指示是否经过灭菌处理。

（3）Bowie-Dick测试（简称B-D试验）：

对预真空和脉动真空压力蒸汽灭菌，定期进行。

2.要求：

（1）应进行包外、包内化学指示物监测。具体要求为灭菌包包外应有化学指示物，高度危险性物 品包内应放置包内化学指示物，置于最难灭菌的部位。如果透过包装材料可直接观察包内化学指示物的颜色变化，则不必放置包外化学指示物。根据化学指示物颜色或形态等变化，判定是否达到灭菌合格要求。

（2）采用快速程序灭菌时，也应进行化学监测。直接将一片包内化学指示物置于待灭菌物品旁边进行化学监测。

（二）生物监测法

1.生物指示物: 

指示物为嗜热脂肪杆菌芽孢(ATCC 7953 或 SSIK 31株)，菌片含菌量为5.0×10·5 ～5.0×10·6 cfu/片。 

2.要求：

（1） 应至少每周监测一次。

（2）紧急情况灭菌植入物时，使用含第５类化学指示物的生物PCD进行监测，化学指示物合格可提前放行，生物监测的结果应及时通报使用部门。

（3） 采用新的包装材料和方法进行灭菌时应进行生物监测。

（4）小型压力蒸汽灭菌器因一般无标准生物监测包，应选择灭菌器常用的、有代表性的灭菌物品制作生物测试包或生物PCD，置于灭菌器最难灭菌的部位，且灭菌器应处于满载状态。生物测试包或生物PCD应侧放，体积大时可平放。

（5）采用快速程序灭菌时，应直接将一支生物指示物，置于空载的灭菌器内，经一个灭菌周期后取出，规定条件下培养，观察结果。

（6）生物监测不合格时，应尽快召回上次生物监测合格以来所有尚未使用的灭菌物品，重新处理； 并应分析不合格的原因，改进后，生物监测连续三次合格后方可使用。

（三）每次进行压力蒸汽灭菌要有相应的记录。

参考资料

1. WS-310 《医院消毒供应中心》2016
2. Ws/T367 《医疗机构消毒技术规范》2012
3. 国家质量监督检验检疫总局令第 140 号 《特种设备作业人员监督管理办法》 2011