划痕实验

研究细胞迁移效率的一个廉价简便的试验方法
需要准备的物件:细胞,无血清培养基,六孔板,Marker笔,直尺,枪头
实验前,超净台紫外灭菌三十分钟,所有能灭菌的器械尽量都灭菌
1、提前一天消化培养皿里面的细胞,铺板六孔板,生长尽量一致,尽量同时长满,方便控制均一性
2、铺板前,先在刚取出的六孔板背后用直尺和笔画横线,作为标记,因为接下来拍照就是依据划痕与黑线交点
3、加入足够细胞,能够在实验时候每个孔都长差不多,基本要求过夜铺满
4、次日铺满以后用枪头比着直尺,尽量垂至于背后的横线划痕,枪头要垂直,不能倾斜。
5、划痕划掉的细胞要用PBS洗掉,不洗掉会对结果有影响,加入PBS最好贴壁加,有些细胞容易被吹起来,根据细胞特性自己注意是不是合适做划痕实验。
5、多次PBS洗去划下的细胞后,加入无血清培养基。
6、放入培养箱。按0,6,12,24小时拍照,尽量拍在自己同一个位置,否则效果不太好,所以一开始可以多画几条黑线多作为取点的地方。