能在pMAL-C2X上面添加His标签,用镍柱纯化吗
纯化MBP的柱子有点贵,实验室也有镍柱;我用pet-32a表达我的蛋白是包涵体,用pMAL-C2X是可溶的。现在想这样:保护碱基+酶切位点+his标签+柔性碱基+蛋白酶切位点+目的基因;一起给连接到pMAL-C2x上面,这样就可以通过His标签纯化;想问下这样可行吗,会不会有什么影响(纯化的缓冲体系不同,让蛋白又不可溶了等等)
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 926
纯化MBP的柱子有点贵,实验室也有镍柱;我用pet-32a表达我的蛋白是包涵体,用pMAL-C2X是可溶的。现在想这样:保护碱基+酶切位点+his标签+柔性碱基+蛋白酶切位点+目的基因;一起给连接到pMAL-C2x上面,这样就可以通过His标签纯化;想问下这样可行吗,会不会有什么影响(纯化的缓冲体系不同,让蛋白又不可溶了等等)
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