关于LPS的相关问题
LPS(Lipopolysaccharides,脂多糖)是革兰阴性菌细胞壁的一种成分,在科研中也是诱导细胞炎症反应的常用试剂。但是在接触LPS的过程中,难免会遇上一些疑惑,以下是自己记录一些笔记。
1、如何选择LPS
目前有很多公司卖LPS,比如sigma、索莱宝等等,不过大家都觉得sigma的更权威。登录sigma的官网( https://www.sigmaaldrich.com/china-mainland.html ,经常登不进),搜索LPS,会出现很多货号的LPS(如图),如何选择自己需要的货号最好的办法就是检索相关文献,参考别人使用的货号,其中L2880是最常用的。(千万不要买错,这个试剂还是挺贵的,而且不能退货,我有个朋友就买错了,十分懊悔。。。)



2、如何配制LPS
一般买回来的LPS均为粉剂,很多人可能会疑惑用什么溶解呢?其实使用PBS或者培基溶解都可以。我一般都是称取10mg LPS,用10ml PBS进行溶解,得到1mg/ml的储存液,4℃(1个月)和-20℃(2年)均可保存。我平时都是根据每次需要量进行分装然后保存在-20℃(避免反复冻融),使用时再根据自己需要的浓度用培基稀释。
3、其它问题
3.1 LPS溶液需不需要保存在硅烷化容器中?
之所以说LPS需要保存在硅烷化容器中是因为它可能会吸附到塑料上,于是我在最开始使用LPS 的时候,询问了很多销售是否有硅烷化的容器售卖,但是结果都是没有。不过当LPS 浓度≥1mg/ml时,吸附在管壁上的量可以忽略,这也是为什么推荐储存液配制为1mg/ml的原因。我最后是1mg/ml的储存液保存于EP管中。
3.2 LPS溶液配制完后需要滤菌吗?
我第一次在Sigma买了10mg的LPS,我是直接在包装瓶里面配制的储存液,没有滤菌,完全没有问题的。后来又在Sigma买了100mg的LPS,因为不可能把100mg一次全部配完,于是称取10mg出来,因为整个操作不可能完全在超净台里面,所以进行了滤菌,也是没有问题的。我个人认为,如果配制中比较注意无菌的话,其实不滤菌是完全可以的。
3.3 LPS溶液处理细胞的浓度如何选择?
最好的方法就是参考文献,尤其是高分文献,根据文献中的浓度直接进行试验,或者根据文献中的浓度做一个比较宽的浓度范围,然后做cck8或者MTT试验,刷选出自己合适的浓度。
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2.9 万