免疫沉淀如何不曝出IgG重链
发布于 2020-11-21 · 浏览 1450 · IP 福建福建
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大家好，实验小白一枚，刚接触免疫沉淀实验1-2个月，还是没办法不曝出IgG重链。努力过的方法：1、使用过Thermo的货号为21230的IP指示剂据说是不识别变性的IgG，我免疫沉淀后加了2xloading buffer，100摄氏度煮10分钟，应该是充分变性了，然而IgG重链还是曝出来了；2、经过一位老师指导，使用不同种属的一抗去拉蛋白和孵育wb膜，我使用兔抗的一抗去免疫沉淀目的蛋白，然后使用鼠抗的抗体去孵育膜，然后使用山羊抗鼠的二抗，结果还是曝出了非常明显的IgG重链。有点苦恼，不知道有没有大神可以在线指导一下，不甚感激～～～
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1450
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