流式细胞术基本知识(流式细胞仪分析、分选细胞系、干细胞)


流式细胞仪常用来检测细胞生化指标和分选特定表型的细胞,在临床诊断、血液学和免疫学研究方面应用非常广泛。在此我将从以下几个方面展开来简单介绍一下流式细胞仪:
一、原理
分选细胞原理:流式分选的机器可以将细胞悬液制成非常细的液流,液流放大来看,细胞正好包裹在液滴之中。在细胞-液滴流动的过程中,可以通过激光的照射给发特定荧光的细胞-液滴施加电压,被施加电压的细胞可以在液流流动的时候被位于液流两侧的电极板通过电场力打出液流,形成支液流,这些打出的细胞可以通过预先调整好的角度打到收集管中用于随后实验。
分析细胞原理:常用于检测某类细胞中带有某种特性表面标志/荧光的细胞所占的比例。在上述分选远离中,特定细胞不会通过电场力而偏转到收集管中,而是通过管道被收集到了废液槽中,只会在软件界面生成相关的细胞-细胞的比例图和实时细胞散点图。
二、分类
流式细胞分选仪:可以同时执行分析细胞和分选细胞的功能,BD公司的FACS air III价格在300万人民币左右,功能齐全,支持单细胞96孔板分选、常规分选、细胞周期分析、细胞凋亡分析等试验。颜色较多,能够支持10多种表面maker的分选。
流式细胞分析仪:除了不能够分选细胞和颜色较少外,常规分析均可完成,BD公司的FACSII待价格大约在100万左右,能支持差不多7种颜色的分选。
三、试验应用
那我们日常科研工作中,有哪些试验可以用到流式细胞仪呢?
- 细胞周期分析
- 细胞凋亡分析
- 特性表面标志细胞比例分析(如加药和不加药组某类细胞比例变化)
- 体外培养特定表型的原代细胞
- 构建稳转细胞系
总结
好的以上就是我暂时整理的流式细胞术方面的简单知识,有需要提问的战友可以在下方评论留言哦!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 7621