GST-Beads洗脱问题
发布于 2020-08-24 · 浏览 2605 · IP 河北河北
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想求助大家一个问题：
我将目标蛋白（带GST标签）在HEK细胞中过表达，然后收集全蛋白去孵育GST-beads（GE Healthcare）做pull down实验，洗脱液（50mM Tris-base,40mM GSH， 0.2M NaCl,最后调PH 8.0）洗脱五六次，但是beads去做Western时，还是显示没有洗脱干净，beads上还剩余好多，说明书里显示，洗脱液中GSH的含量可以是10mM-40mM。但是我已经用到40mM的GSH仍然不能将beads上的蛋白洗干净，请问这是为什么？有什么解决方式吗？大家在用beads 拉蛋白时能洗脱干净吗？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2605
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