RAW264.7的培养

养了一年的RAW264.7，细胞状态还可以，大部分还是圆形，没有长角分化，总结的培养和传代经验和大家分享一下。

从上海细胞库买的RAW264.7细胞，培养基用DMEM，10%的血清，5%CO2，37℃培养 。细胞长得很快，一传二的话2-4天就一定要传代了。传代方法就是冷PBS吹打，先加PBS洗1-2遍，再加入冷PBS静置3分钟，如果PBS不冷，就放4℃3分钟。然后用5ml的*吹打，手法轻柔，不用多次重复吹打细胞就可以下来，然后离心弃上清，用培养基重悬，分装到培养瓶中。网站上面说用细胞刮刀，两种方法我都试过，刮刀对细胞损伤较大，传代后飘着的细胞比吹打传代的多。

还有一点，这个细胞确实不要传代次数太多，要边传边冻存，传代次数多了之后不可避免的细胞分化越来越多，吹打的时候也越来越难吹下来。不是说要多费力才能下来，就是自己的一种感觉。