双荧光素酶报告基因实验

大家好啊，我是一个实验新手，最近需要做报告基因实验，求助大家一下。

目的：验证B是A转录因子，可调控A。

步骤：

1.我打算将A基因启动子加在pGL3-basic上，同时构建B转录因子质粒。请问这样是否合理？

2.前期实验验证在鼠细胞中，那我的质粒是不是也必须是鼠源？

3.A和B的实验在鼠做了，做报告基因实验时，将A.B两质粒转染进293 可以吗？种属不同有影响么？

4.关于A基因启动子加在pGL3质粒，大概需要多长，还是分别设计1kb/3kb/6kb不等，进一步筛选呢？

5.因为有看到找预测结合位点时候，有人设计了很长的promoter，然后大约4.5-6kb段果然有预测到位点，但是现在我用jaspar预测，只能预测3kb以内，求助，还怎么办啊。

非常希望有人能给我指点迷津，看了很多资料和帖子有点混乱，非常感谢大家。要是我没说明白，在问我就好，谢谢了。