求助用GC/MS做代谢组学实验
发布于 2019-10-10 · 浏览 1891 · IP 山东山东
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看了文献，很多都是如下过程：
Ø 收集细胞于2ml EP管中，加入1.5ml -80℃纯甲醇淬灭；加内标L-2-氯苯丙氨酸(0.3mg·ml–1，甲醇配制)20 µl,涡旋混合后，超声破碎10min；离心后取400µl上清液转移到气相小瓶，氮气吹干；进行衍生化：加甲氧胺吡啶80µl，涡旋2min，37℃反应90min，再加BSTFA (含1% TMCS) 80µl和20µl正己烷，涡旋2min，70℃反应60min；室温放置30min后，有机滤膜过滤后进样。
Ø GC/MS分析条件：进样量为1.0µl; 载气为氦气，流速为0.6mL/min；升温程序：50℃，50-300℃ 8℃/min，300℃ 10min；进样器、离子源和管道温度：280℃；电子能是70ev；全扫描模式，扫描时间为0.5s，扫描范围为35-600m/z；溶剂延迟时间：5min。
Ø 仪器型号：安捷伦的7890B-5977A；柱子型号：DB-5MS毛细管柱(30 m × 0.25mm × 0.25 μm, 安捷伦)
但结果中均为体现出内标在哪儿，我现在想定量，重复多次仍然找不到内标峰。因为首次尝试，现在怀疑自己可能在如何归属这儿没搞清楚，希望有做过这个的老师能解答一下，谢谢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 1891
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