酵母用醋酸锂法转化后出现大量假阳性
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最近在构建几种基因敲除的菌，野生型菌在G418的板子上长不出来，所以用带有卡纳抗性的质粒p出片段后，采用同源臂交换的方法进行目的基因的敲除，前几次在30mg/ml浓度的G418平板上几次转化不成功后，改进为采用20mg/ml浓度的G418平板进行转化，转化效率还可以，然后用30mg/ml和40mg/ml的板子进行划线，有的菌在高浓度的G418平板上依旧长得很好，所以进行了菌p检测，但依旧有条带，说明目的基因根本没有被敲除，为什么会出现这样的状况呢？有什么方法改进吗？
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 4936
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