大肠杆菌转化
最近在做大肠杆菌质粒转化,转化后培养皿上一个菌株都没有,步骤,-80度取出大肠杆菌,冰上解冻,50ul菌+5ul质粒,轻拨混匀,冰上静置30min,42度热激85S,冰上3min,加900ul不含抗生素LB,*头轻混匀,200r/min,37度摇床,1小时;4000r/min,离心2min;弃上清,留200ul,轻吹来细菌;铺板,玻璃推提前半小时酒精消毒,冷却;板子放到37度恒温湿箱12-16h,请大神帮忙分析一下原因,谢谢
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 3225
最近在做大肠杆菌质粒转化,转化后培养皿上一个菌株都没有,步骤,-80度取出大肠杆菌,冰上解冻,50ul菌+5ul质粒,轻拨混匀,冰上静置30min,42度热激85S,冰上3min,加900ul不含抗生素LB,*头轻混匀,200r/min,37度摇床,1小时;4000r/min,离心2min;弃上清,留200ul,轻吹来细菌;铺板,玻璃推提前半小时酒精消毒,冷却;板子放到37度恒温湿箱12-16h,请大神帮忙分析一下原因,谢谢
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