关于小鼠肝脏蛋白提取的问题！！！

肝脏蛋白提取，有什么特别需要注意的吗。我最近提取过两次做wb，蛋白定量结果浓度很高，但一直没有条带出来，内参都没有。我觉的是蛋白提取的问题。在提取过程中，离心后发现，最上层有一层透明胶状的物质，这是什么？我没有吸取，就穿过吸取中间的。老觉得，自己提取的有问题。

 我用的是碧云天的裂解液，匀浆法。组织是去年10月收集放负80度的。裂解大概10到20分钟，离心10到15分钟。取上清，加热变性。之前按这些方法提取睾丸是可以做出来的。不知道为什么到肝脏就不行了。