关于提取百日咳杆菌RNA检测百日咳杆菌
这个帖子发布于 8 年零 144 天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
新手求教。
目前市面上有很多试剂盒可以提取百日咳杆菌DNA检测百日咳。多是根据百日咳杆菌插入序列IS481为靶区域，设计特异引物和探针。
我有个新课题是提取百日咳杆菌RNA来检测百日咳杆菌。我咨询了一下，通过RNA检测，只是需要在PCR反应液中加入逆转录酶即可，而设计百日咳杆菌插入序列IS481的特异引物和探针遇到了困难。
首先通过NCBI直接搜索白日杆菌插入序列IS481，结果出来很多， 有点不知道选择哪一个，界面如下
查阅的文献资料上引物在NCBI 上无法BLAST,出来的界面如下。
然后自己通过NCBI直接设计引物依然不行，界面如下
最后就自己通过Primer5.0设计引物。
求大神帮我看看，我以上的思考方法是对的方向么？
我通过Primer5.0设计出了引物，NCBI无法BLAST，那我该这么确认我设计出的百日咳IS481序列的特异性呢?
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