image J 测心肌细胞大小

第一次用image J 测量心肌细胞大小，自己摸索走了弯路，写出来供靠自己摸索的小白参考，也欢迎纠错。

1.测量心肌细胞大小需要先在显微镜下摄片，要注意观测倍数是“物镜的倍数乘以目镜的倍数”，而不仅仅是物镜的倍数。下图就是物镜，当用20x观测时，实际是20x10=200倍，因为该显微镜的目镜倍数为10。

2.要拍出能在image J软件下能够很好的测量大小的照片，注意要拍横截面的图片，不要拍纵切面的图片。下图一是横截面，图二是纵断面。图二没法用来勾勒边界。

3.我拍的照片当时电脑上没有bar,后期自己回来添加，可以用PPT做。

4.在image J软件中选择open，打开需要处理的图片后，首先要计算bar的像素大小。

（图一）先点击红箭头所示的直线工具，（图二）在图片中按照bar的长度照着画一条直线（黄线所示），（图三）画完直线后点击Analyza下拉菜单中的Measure.（图四）结果出现result框。

5.接下来设置比例尺。"Distance in pixels"是“距离用像素表示是多少”，上一步已经由软件测算出来是623；"Known distance"表明“这个距离相当于多少的实际距离“，在上一步骤中测量的线段长度(即bar的长度)实际值为200μm，因此此处填200；“Pixel aspect ratio”是指“像素的宽高比”，默认1，具体比值可以通过"ImageJ->Properties"来查看；Unit of length：单位长度的像素是多少，此处写μm。

6. 设置完毕后开始测量

点击下图的心形，接下来就可以在图片上圈定细胞边界，画好边界后同样在analyze下选择Measure，在result里面便可看到测算出的面积。

7.收集好数据便可开始统计了