关于组织学如何如何定位M2型巨噬细胞（CD68+CD163)

最近看到很多人在询问如何定位巨噬细胞M2亚型巨噬细胞的帖子，最近自己也在做这方面的实验，和大家分享一下。

巨噬细胞功能极化对机体抗病原菌感染及损伤修复的质量和效率具有重要作用。巨噬细胞有不同的极化方式，如机体遇到细胞内病原微生物感染时，巨噬细胞会表现出经典型极化（M1）并表达相应的促炎因子TNF-α、IL-12及iNOS来清除病原微生物。同时，Ｍ１产生可诱导性一氧化氮合成酶（ｉＮＯＳ）在胞内合成大量ＮＯ，典型的Ｍ１细胞是Ｉ型反应中的效应细胞，它们杀伤微生物和肿瘤细胞，分泌大量炎性因子。；另一方面，当机体遇到细胞外病原微生物如寄生虫感染或过敏原等刺激时，巨噬细胞发生替代激活（M2）并表达Arg1，Ym1及Fizz促进寄生虫的清除，Ｍ２ａ、Ｍ２ｃ的精氨酸则由精氨酸酶代谢为鸟氨酸和多胺，Ｍ２限制炎症反应和Ｉ型适应性免疫，清除残留物，促进血管生成，参与组织重塑和修复。。因此，巨噬细胞的极化的精确调控对维系机体健康十分重要。

以为M2亚型的细胞能够限制炎症的反应，所以一般在组织修复过程中我们会比较关注M2亚型细胞的表达。

如图所示：巨噬细胞的标记物包括CD68,CD80,CD163等等，当巨噬细胞出现极化时，M2亚型的细胞的标记物就变成了CD163,所以，可以通过免疫荧光双染的方法来确定M2亚型细胞的表达。即（CD68 +CD163）。

下面是我在实验过程中通过荧光双染得到的结果。

绿色的荧光是M2亚型的巨噬细胞，视野中存在较少，红色的荧光是所有的巨噬细胞，可以看出视野中存在的巨噬细胞较多，最后一张是合成在一起的图，红色和绿色合在一起的即定位的是M2型巨噬细胞。