(共享)ELISPOT法的原理,操作及技术优势
ELISA 通过显色反应,在酶标仪上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。
ELISPOT 也是通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下人工计数斑点或通过 ELISPOT 分析系统对斑点进行计数, 1 个斑点代表 1 个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。(某些研究不仅要测细胞因子生成量,还需检测分泌此细胞因子的细胞频率)
由于是单细胞水平检测, ELISPOT 比 ELISA 和有限稀释法等更灵敏,能从 20 万 -30 万细胞中检出 1 个分泌该蛋白的细胞。
ELISPOT 法在检测低频率产生细胞因子的细胞时具有独一无二的敏感性。ELISPOT 分析使单细胞分泌产物可视化。这些分析异常敏感,因为它是在直接在分泌细胞的周围进行捕捉,而且是在表面被冲淡,或者被临近的细胞上的受体捕获,或降解之前。

最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 698