his-tag标签纯化???
本人表达了带有his-tag标签的溶合蛋白(5.7kD),过Ni+柱进行纯化,平衡液为0.02M磷酸盐和0.2M的氯化钠,用0.02M-0.3M的咪唑洗脱,洗脱在0.02M洗脱液中出峰,其它浓度均未出峰,电泳结果中,杂蛋白中出现目的蛋白带,洗脱后的蛋白中没有所要的目的蛋白。因此判断 his-tag标签蛋白没有与柱结合。请教需要改善什么条件,使蛋白结合在柱上。谢谢!!!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 2559
本人表达了带有his-tag标签的溶合蛋白(5.7kD),过Ni+柱进行纯化,平衡液为0.02M磷酸盐和0.2M的氯化钠,用0.02M-0.3M的咪唑洗脱,洗脱在0.02M洗脱液中出峰,其它浓度均未出峰,电泳结果中,杂蛋白中出现目的蛋白带,洗脱后的蛋白中没有所要的目的蛋白。因此判断 his-tag标签蛋白没有与柱结合。请教需要改善什么条件,使蛋白结合在柱上。谢谢!!!
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