【求助】以NAD为辅酶的酶促反应，连续酶标测不出曲线

鄙人最近要建一个以NAD为辅酶，产生NADH的酶促反应模型，也算是双底物酶促反应。采用了的两种测定方法：1.荧光法，使用底不透明的黑色酶标板，340nm激发波长，460nm发射波长测NADH产生速率。2.普通酶标：UV96孔板，普通96孔板，石英板都用过，340nm测吸光度。都是1次/min，连续1h。
测正交试验就没做出上升的曲线。后来的单因素：固定底物，不同浓度NAD的反应也没有上升曲线，有时buffer与双蒸水居然会抛出很好的曲线。而且两台酶标仪（普通酶标与荧光酶标）都是这种情况，所以仪器的问题不大。急求做过以NAD为辅酶的酶促反应的专家指导。要是哪位贵人知道怎样稳定NADH，也可以赐教小生。小生感激涕零，泣不成声。