【共享】制备腹水是血水且第二天就死亡

我最近制备腹水时遇到了一些问题，
腹部膨大后就开始采，采出的大部分是血水，不是透亮的淡黄色，结果第二天就死了，我总结了下，可能是由于：
1，用的老鼠是8周龄的，公鼠，最好用开产过的母鼠，还有说是用昆明鼠和Balb/c杂交的鼠，个体较大；
2，注射的矿物油过期，没有起到抗应激的作用；
3，注射细胞的量由于计数的原因可能不太准确，注射时可能插到腹部肠道，会有实体瘤产生，还有就是杂交瘤细胞自身的一些因素（比如对细胞的刺激比较强）
4，采集腹水时针头插到内脏也是有可能的，
所以我决定下次制备腹水时：
1，用开产过的母鼠，腹部较大；
2，用不完全弗氏佐剂0.5ml，普遍反映这个比较好用；
3，减少细胞的注射量，用50万，可能产生腹水的时间会变长，
4，采集腹水时要小心，不要插到腹部肠道及内脏。
希望会有好的结果。