【求助】层析柱暂停溶液流洗问题

我这边是做蛋白质纯化的。在精制步骤使用了层析柱上样后（蛋白质是挂在柱子上的），接下来两步流洗都是洗脱杂质，第三步则是洗脱目的蛋白。因溶液配制的时间误差，导致在第二步流洗时溶液不够，层析柱暂停流洗大约1个小时后才又继续流洗。请教下，这种情况对第三步骤目的蛋白的洗脱会不会有影响？非常感谢！

该目的蛋白在这种层析温度下短时间内还是比较稳定的。