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关于半定量PCR和相对定量PCR(原创)

最后编辑于 2022-10-09 · IP 香港香港
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这个帖子发布于 20 年零 223 天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
看到本版中的一些战友对半定量PCR和相对定量PCR区分的不是很清楚,特根据我的经验作些解释:其实这是两种不同的分类体系,一种是定性PCR,半定量PCR和定量PCR,一种体系是绝对定量PCR和相对定量PCR。
定性PCR即普通PCR,仅仅是有无的确定,没有量的概念;半定量PCR要求比普通PCR更严格一些,另外往往通过转膜后的同位素杂交检测或凝胶成像后的灰度测定比较样品间的差异。
定量PCR主要是指竞争性PCR和real time PCR。前者可半定量PCR一样,是一种终点定量的方法,,原理和操作都比较复杂,有试剂盒可用。后者才是真正意义上的定量PCR。可以实时观测扩增情况。
绝对定量需要标准品做标准曲线,计算绝对拷贝数;相对定量需要内参照,计算样品间的相对量。一般多用real time的方法。


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