我现在正在对一个基因做定点突变,所采用的原理和步骤,是按照Stratagene Quickchange 定点突变试剂盒的说明书来做的,也就是用突变引物扩增含有目的基因的全质粒,引物的设计也是严格按照说明书。不过,由于进口试剂盒较贵,我没有买试剂盒,也没有买说明书建议的stratagene公司的pfu turbo酶。而是自己买国产酶来做。我买的酶是北京全式金公司的fastpfu,说明在此:
http://www.transgen.com.cn/gongsichanpin-show.asp?id=116
请问,国产的酶能用吗?是否一定要用进口的pfu turbo或者KOD酶?
附上我做出来的效果图,PCR的结果是拖带,没有扩增出我理想的条带(我的质粒为5KB)。
请问,问题可能出在酶上,还是其它地方?
谢谢!