如何用Primer premier 5.0计算一对引物的最适退火温度?
我以前用Primer premier 5.0设计引物,根据该软件推荐的最适退火温度进行PCR或RT-PCR时都很容成功扩增.但有时止标序列只是一个基因的开放阅读框架时,引物的设计就没有选择的余地,因此好象很难用软件设计出合适的引物,只能从ORF的两侧取一定的碱基序列作为引物,但这样的话,最适的退火温度如果用Primer premier 50该怎么计算呢?有哪位高手指点一二.谢谢!
最后编辑于 2022-10-09 · 浏览 6570