我表达的蛋白带很多正电荷,是有毒性的,因此在前面融合了一个差不多大小的带负电的肽段来中和它,并且在蛋白C端设计了编码6个组氨酸的序列。理论上应该有表达,但是SDS-PAGE看不出有条带。并且用poly-his protein purification kit作亲和层析也没有纯化产物。而我的同学在GST融合表达载体,也是SDS-PAGE看不到条带,用亲和层析就有结果。不知道是因为我的表达量太低,还是作纯化没有技巧。因为poly-his protein purification kit洗脱要三次,咪唑的量依次上升,不知道理论上是第几次洗脱出来。请用过poly-his protein purification kit装置的指教。 再有,我想查有关6个组氨酸纯化的博硕士论文,不知关键词应该怎么输入。