【求助】肠激酶酶切后出现规律的非特异条带
发布于 2008-02-27 · 浏览 7380 · IP 广东广东
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从左往右，1：样品蛋白酶切3小时
2：5小时；3: 7小时；4：9小时 温度26，NOVAGEN的rEK，酶与蛋白比例大概为1单位：30微克。
5：未切的样品蛋白 23KD左右
6：MARK12，最下面应该是2.5和3.5，没有明显跑开，依次为6，14.4，21.5，31
7：基本同1-4 ，酶与蛋白比例大概为1单位：75微克。
此样品蛋白为融合蛋白，23KD,经过NI柱后可以看到目的蛋白比较干净，理论上酶切后应该有两条带，分别是17.5KD和5.5KD。但是非特异条带很多。另外，用肠激酶附带的对照蛋白尝试切割，结果没有非特异性，比较郁闷。请大家帮忙分析一下！
2：5小时；3: 7小时；4：9小时 温度26，NOVAGEN的rEK，酶与蛋白比例大概为1单位：30微克。
5：未切的样品蛋白 23KD左右
6：MARK12，最下面应该是2.5和3.5，没有明显跑开，依次为6，14.4，21.5，31
7：基本同1-4 ，酶与蛋白比例大概为1单位：75微克。
此样品蛋白为融合蛋白，23KD,经过NI柱后可以看到目的蛋白比较干净，理论上酶切后应该有两条带，分别是17.5KD和5.5KD。但是非特异条带很多。另外，用肠激酶附带的对照蛋白尝试切割，结果没有非特异性，比较郁闷。请大家帮忙分析一下！
最后编辑于 2008-03-07 · 浏览 7380
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