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从事牙髓细胞培养的战友请进!! [精华]

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如果是组织块酶消化法,用什么酶最好呢?胶原酶还是胰蛋白酶?浓度多大?
快一个月了,才有一块组织块贴壁,细胞爬出来了.下面我该怎么处理呢?只换液是不是不行?很担心好不容易爬出来的细胞死掉
2007-06-25 15:39
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单纯牙髓细胞的培养能否让其分化为各种功能细胞啊?
2007-07-09 20:00
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各位战友好:
我养人原代牙髓细胞已经3个多月了,用的是组织块酶消化法,现在每瓶组织块都有细胞爬出来,但是细胞生长速度很慢,4周根本不能传代。我想说一下我的实验方法请各位战友看看是哪里有问题。
取新鲜牙齿立即放入含200U/ML双抗的PBS中,大约40分钟后到实验室,用钳子夹碎牙齿,取出牙髓,并将其置于含200U/ML双抗的D-HANK'S中浸泡五分钟,剪碎,加0.1%的1型胶原酶2ML,消化15分钟,1500RPM离心5分钟,弃上清,用含10%FBS的培养基2ML打散组织块,1500RPM离心5分钟后,加1ML的培养液打散放入CORNING塑料培养瓶中,24小时后,再加培养液1ML,一般情况下大概有一半的组织块贴壁。
一般第五天会有细胞爬出,但是从此细胞长的很慢,一般只有一个组织块长势会好一点,其它组织块细胞很少。4周大概只铺满瓶底的30%,
我不知道是什么原因,都快急死了,请各位战友多多帮忙
2008-07-15 19:59
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你是不是离心的转速太快了
2009-12-29 23:01
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