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从事牙髓细胞培养的战友请进！！ [精华]

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夏701

入门站友

36楼

如果是组织块酶消化法,用什么酶最好呢?胶原酶还是胰蛋白酶?浓度多大?
快一个月了,才有一块组织块贴壁,细胞爬出来了.下面我该怎么处理呢?只换液是不是不行?很担心好不容易爬出来的细胞死掉

2007-06-25 15:39

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• 急诊遇见左主干，一群主任围着看

unicornkingz

入门站友

37楼

单纯牙髓细胞的培养能否让其分化为各种功能细胞啊?

2007-07-09 20:00

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• 丁香早知道 - 11.13 | 母亲急性心梗，我给母亲做了人生第一台急诊手术！

xiaomihuxyj

入门站友

38楼

各位战友好：
我养人原代牙髓细胞已经3个多月了，用的是组织块酶消化法，现在每瓶组织块都有细胞爬出来，但是细胞生长速度很慢，4周根本不能传代。我想说一下我的实验方法请各位战友看看是哪里有问题。
取新鲜牙齿立即放入含200U/ML双抗的PBS中，大约40分钟后到实验室，用钳子夹碎牙齿，取出牙髓，并将其置于含200U/ML双抗的D-HANK'S中浸泡五分钟，剪碎，加0.1%的1型胶原酶2ML，消化15分钟，1500RPM离心5分钟，弃上清，用含10%FBS的培养基2ML打散组织块，1500RPM离心5分钟后，加1ML的培养液打散放入CORNING塑料培养瓶中，24小时后，再加培养液1ML，一般情况下大概有一半的组织块贴壁。
一般第五天会有细胞爬出，但是从此细胞长的很慢，一般只有一个组织块长势会好一点，其它组织块细胞很少。4周大概只铺满瓶底的30%，
我不知道是什么原因，都快急死了，请各位战友多多帮忙

2008-07-15 19:59