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蛋白质和糖学
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蛋白质和糖学技术讨论版
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请教：如何得到比较纯的包涵体
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楼主
feixzh
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丁当
1楼
这个帖子发布于
16年零184天
前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
各位战友：我提的包涵体老是有菌体蛋白的杂带，请问如何去除，尽可能得到比较纯的包涵体？谢谢
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不知道邀请谁？试试他们
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2004-05-02 18:43
浏览 : 5096
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腹痛数日
常子
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2楼
包涵体有菌体蛋白的杂带是正常的，在后处理的纯化过程中可除去。
2004-05-02 18:54
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考研倒计时 60 天，你都在哪里复习冲刺？
greenfield
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3楼
对于包涵体的处理是一件很麻烦的事情，主要是看你是否要求得率，如果你只是想得到比较纯的包涵体不考虑得率可能还容易一点。一般处理包涵体的步骤是首先是缓冲液（如10-50mM PB或Tris, PH8.0左右均可）洗涤；然后缓冲液中加Triton、吐温等洗涤；三就是加低浓度的尿素或盐酸胍（条件需要摸索）；这些是一些简单的阐述，另外，你还可以用分子筛来纯化包涵体，我看了几篇文献中的效果还算很好，具体操作过程你可以找一些文献来看看。祝你试验顺利。
2004-05-02 19:19
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医学僧找工作之议——城市选择！
chromatography
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丁当
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4楼
包涵体的洗涤用通常的方法我试过都不是很好，因为那些洗涤的方法都没有办法把包涵体中的杂质去掉，所以最有效的方法是先用6M盐酸胍溶解，然后再分别用水稀释到4M,3M,2M,1M.这样得到的沉淀跑电泳，最后哪个浓度得到的包涵体纯，那就用那个浓度，这样可以把包涵体中的杂质 去掉，相当于分级沉淀，这样得到的包涵体比通常洗涤的更纯。
2004-05-02 21:14
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博导不闻不问
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