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【求助】双荧光素酶测定实验讨论

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楼主

铁杆站友

1楼

这个帖子发布于12年零55天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

有战友建议发起双荧光素酶实验的讨论，我深有同感，做实验一年，发现须解决的问题仍多多。

我用过Roche的单荧光素酶，和promega 的双荧光素酶测定系统，试过不同的比率（renilla and pGL3 promoter vector (or pGL3 control vector), 但是我发现normalize 后，比率全都接近于1，我不知道是不是存在quencing 的问题。请大家告诉我你们经常用的比率是多少？是否遇到过第一荧光猝灭不完全的现象？还是因为renilla 本身的荧光就很高。

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2007-07-24 17:39 浏览 : 4096 回复 : 7

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• 当医生遇到这些个奇葩主诉，直接吐血三升

入门站友

2楼

大约是0.2-1之间

2007-07-25 16:21

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楼主

铁杆站友

3楼

dove0260, 谢谢您的回复，您是说renilla and pGL3 promoter vector 的比率吗？　，那您的第一荧光和海参荧光的比率是多少？谢谢。

2007-07-25 19:34

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入门站友

4楼

转染的时候 pGL3 promoter vector /renilla的比例是20：1，测出的荧光相对比值是0.1-1之间，具体还要根据自己的细胞摸索条件

2007-07-25 21:38

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