• 论坛首页
  • 我的丁香客
  • 找人
    查找好友
  • 更多
    丁香园
    丁香通
    丁香人才
    丁香会议
    丁香搜索
    丁香医生
    丁香无线
    丁香导航
    丁当铺
    文献求助
    医药数据库
    丁香诊所
    来问医生
登录 注册

分析技术

关注今日：10 | 主题：336512
论坛首页  >  分析技术讨论版   >  中药|天然药
  • 发帖
    每发1个新帖
    可以获得0.5个丁当奖励
  • 回帖

分享到：

  • 微信

    微信扫一扫

  • 微博
  • 丁香客
  • 复制网址

【求助】DPPH法测定绿茶抗氧化活性

  • 查看全部
  • 页码直达：
  • 直达末页
楼主 ddgrace
ddgrace
入门站友

  • 0
    积分
  • 4
    得票
  • 79
    丁当
  • 1楼
这个帖子发布于14年零50天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
求助，我现在需要测定绿茶抗氧化活性，使用DPPH法进行测定。但是遇到了非常多的困难，希望得到大家的帮助，非常急！
看到比较多的文献的方法是这样的：
供试品溶液的制备：称取绿茶0.2g放入干燥的具塞试管中，加20ml无水乙醇，置于超声清洗仪中超声提取1.5小时，过滤，滤液定容于50ml容量瓶中，取此溶液0.6ml，加无水乙醇稀释至100ml。即得供试品溶液。取供试品溶液2ml，与2×10-4mol/L DPPH溶液2ml加入同一具塞试管中，摇匀，放置30min后，于517nm用无水乙醇作空白测定其吸光度Ai，同时测定2×10-4mol/L DPPH 溶液2ml与2ml无水乙醇混合后吸光度Ac，以及2ml供试液与2ml无水乙醇混合后的吸光度Aj，根据公式计算抑制率。
公式：抑制率 =[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％
其中：Ai——加抗氧剂时 DPPH 溶液的吸光度；Aj——提取液在测定波长时的吸光度；Ac——未加抗氧剂时 DPPH 溶液的吸光度。

遇到的困难如下：
1、DPPH的浓度，为什么选择2×10-4mol/L呢，用别的浓度抑制率会不一样，那么怎么评价到底用哪个浓度呢？那个浓度稳定呢？做怎样试验会知道结果
2、我的供试品是茶晶，但是不完全溶于无水乙醇，那么浓度如何计算呢？因为还要做一系列的浓度做标准曲线，然后计算IC50，
3、IC50到底是怎样的，有单位吗？是浓度还是抗氧化能力的高低呢？
4、对照品的选择。需要选择一个阳性对照来比较我们的产品(绿茶）的抗氧化活性的高低。原来我们选择维生素E，因为很多网上都提到维E是很好的抗氧化剂，但是从中检所买回来的维E居然不溶于乙醇，很多文献都是用乙醇溶解维E的。那么还有什么阳性对照品可以选择吗？
5、阴性对照，领导一定要求选择一个阴性样品来进行对照，说明没有抗氧化性的情况。我选择什么呢？有没有提示可以帮助帮助我。这个很急很急。
  • 邀请讨论

    • 不知道邀请谁？试试他们

    换一换
2007-02-26 11:19 浏览 : 13012 回复 : 21
  • 投票 1
  • 收藏 8
  • 打赏
  • 引用
  • 分享

    • 微信扫一扫

    • 新浪微博
    • 丁香客
    • 复制网址
  • 举报
    • 广告宣传推广
    • 政治敏感、违法虚假信息
    • 恶意灌水、重复发帖
    • 违规侵权、站友争执
    • 附件异常、链接失效
    • 其他
  • • 理性讨论：2021主治考试到底难不难？
楼主 ddgrace
ddgrace
入门站友

  • 0
    积分
  • 4
    得票
  • 79
    丁当
  • 2楼
怎么没有人给我回复呢？
2007-02-26 14:47
  • 投票
  • 收藏
  • 打赏
  • 引用
  • 分享

    • 微信扫一扫

    • 新浪微博
    • 丁香客
    • 复制网址
  • 举报
    • 广告宣传推广
    • 政治敏感、违法虚假信息
    • 恶意灌水、重复发帖
    • 违规侵权、站友争执
    • 附件异常、链接失效
    • 其他
  • • 2021【妇产科】中级考试集结地，欢迎讨论你的考后感受！
楼主 ddgrace
ddgrace
入门站友

  • 0
    积分
  • 4
    得票
  • 79
    丁当
  • 6楼
还有一些问题，
1、你提到“DPPH浓度过高， 而待测化合物浓度不高，则需很长时间或不能有效清除DPPH（紫色不易变浅）。
若DPPH浓度过低，待测化合物加入后可使紫色迅速变浅（几秒钟），导致无法得到有价值数据。”，我使用DPPH溶液是2×10-4mol/L的浓度，加入供试品溶液(抗氧化剂）之后，变色是非常快的。不知道数据有没有价值。那么在多久时间内变浅算是合适的呢？
2、如果我的阳性对照品用的是“槲皮素”，而我的供试品是绿茶无水乙醇溶液，那么用对照品或供试品做的预试验的DPPH浓度，是否都能符合其他的样品呢？因为我们的样品不止有一种
3、是否对于每个样品来说，都必须做一系列浓度的试验，以至得出IC50时的浓度，才能比较抗氧化活性的高低。
2007-02-27 09:05
  • 投票
  • 收藏
  • 打赏
  • 引用
  • 分享

    • 微信扫一扫

    • 新浪微博
    • 丁香客
    • 复制网址
  • 举报
    • 广告宣传推广
    • 政治敏感、违法虚假信息
    • 恶意灌水、重复发帖
    • 违规侵权、站友争执
    • 附件异常、链接失效
    • 其他
  • • 2021内科主治专业实践能力
楼主 ddgrace
ddgrace
入门站友

  • 0
    积分
  • 4
    得票
  • 79
    丁当
  • 9楼
我对这个公式也不是很明白，能否给解释一下呢？
公式：抑制率 =[1-(Ai-Aj)/Ac]×100％
其中：Ai——加抗氧剂时 DPPH 溶液的吸光度；Aj——提取液在测定波长时的吸光度；Ac——未加抗氧剂时 DPPH 溶液的吸光度。
2007-02-27 09:36
  • 投票
  • 收藏
  • 打赏
  • 引用
  • 分享

    • 微信扫一扫

    • 新浪微博
    • 丁香客
    • 复制网址
  • 举报
    • 广告宣传推广
    • 政治敏感、违法虚假信息
    • 恶意灌水、重复发帖
    • 违规侵权、站友争执
    • 附件异常、链接失效
    • 其他
  • • 2021中医内科主治真题回忆(相关专业知识)

关闭提示

需要2个丁当

丁香园旗下网站

  • 丁香园
  • 用药助手
  • 丁香通
  • 文献求助
  • 丁香人才
  • 丁香医生
  • 丁香导航
  • 丁香会议
  • 手机丁香园
  • 医药数据库

关于丁香园

  • 关于我们
  • 丁香园标志
  • 友情链接
  • 联系我们
  • 加盟丁香园
  • 版权声明
  • 资格证书

官方链接

  • 丁香志
  • 丁香园新浪微博
引用回复