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做石蜡切片时二甲苯透明时间长短对切片有何影响

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楼主

liq2005liq

入门站友

1楼

这个帖子发布于14年零36天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我的大鼠脑组织标本拿到病理科包埋后，结果片子一切就卷成小棒，始终不能成开。后来在园子里看了一些经验介绍，考虑可能是病理科的自动脱水机脱水时间不够，也不知道是不是这个原因，不管怎样先打算自己脱水试一次。有人说二甲苯透明很关键，它透明的时间过长或过短对标本具体有什么影响呢，哪位大侠能否指教一下。

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2006-12-24 21:36 浏览 : 11769 回复 : 1

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bagelo

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2楼

最好把整个脑组织先进行修块，完整的脑组织不容易脱水和透明。修块之后（基本是完整脑的一半大小）脱水，70%80%90%95%到100%酒精时两次，总时间别超过两小时，二甲苯透明两次，总时间别超过40分钟，时间长了组织会脆。苯蜡15分钟，软蜡30分钟，硬蜡1.5小时，包埋

2006-12-25 19:48

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小小冰

铁杆站友

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3楼

bagelo
最好把整个脑组织先进行修块，完整的脑组织不容易脱水和透明。修块之后（基本是完整脑的一半大小）脱水，70%80%90%95%到100%酒精时两次，总时间别超过两小时，二甲苯透明两次，总时间别超过40分钟，时间长了组织会脆。苯蜡15分钟，软蜡30分钟，硬蜡1.5小时，包埋

***********
1.取材：切取你所需要部位，厚度在0.3～0.4mm之间；
2.脱水：60％、70％、80％、90％、95％、100％酒精每缸20min；
3.透明：100％酒精＋二甲苯1：1混合液20min，二甲苯10min；
4.浸蜡：普通蜡30min即可。

二甲苯浸润过长或过短都会影响切片，但是切出好的片子，不但但是二甲苯所能决定的，所以你要注意的是：
1.组织要固定好（大鼠的脑组织一般需要48h）；

2.是脱水的时间，对于容易酥脆的组织要注意在低浓度的酒精开始脱水（比如小鼠的脾组织，在50％的酒精开始脱水，效果很好），70％-80%酒精脱水效果最好，对于比较容易酥脆的组织要注意（特别是没有脱水机需手动脱水）；

3.二甲苯的透明可以先用100％酒精＋二甲苯1：1混合液缓冲一下，在进入二甲苯液中，可以减轻组织酥脆的情况；

4.浸蜡时要特别注意温度和时间，在30min温度保持在60度（普通的蜡熔点在54-56度），无需在使用苯蜡和硬蜡。

2006-12-25 22:02

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小小冰编辑于 2006-12-25 22:17

• 【规培笔记128】—工作报告偶遇，颅脑MR，据说工作中很罕见——肾性脑病！

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