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分析技术

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【求助】氨基酸的PITC衍生条件???

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楼主 qulyn
qulyn
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这个帖子发布于14年零125天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。
看到很多文献报道,测定氨基酸时用PITC先柱前衍生化,该反应体系能不能有水的存在呢?如果说是不能含水?是什么原因呢?是因为在水的情况下氨基酸不稳定呢还是衍生化试剂不稳定,抑或是产物不稳定?期待大虾们的指点?先谢过了:)
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2006-11-02 00:15 浏览 : 4274 回复 : 6
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redangel007
redangel007
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  • 2楼
异硫氰酸苯酯分析纯的买不到,,,我用的是化学纯的,
流动相A: 0.05mol/L醋酸铵溶液-乙腈(97:3)(用醋酸调pH=6.4)
流动相B: 乙腈-水(4:1)
时间(min) B%
0 0
7 18
25 27
39 30
40 80
42 100
45 0
个人用的色谱仪不同,梯度条件也会不同,,,我用的是岛津的仪器,,和Waters的梯度原理不太一样,你自己可以再调试一下. 这个系统在50分钟之内分出所有17个组分峰

另外,在这里还有一点:http://www.dxy.cn/bbs/thread/6335189
这是我以前回的别人的帖子,希望能帮你
2006-11-04 17:05
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redangel007
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  • 3楼
方法是这样的:

将产品配成大约10mg/ml的溶液,精密量取溶液200μl置于2ml离心管中,加入0.1mol/L的异硫氰酸苯酯乙腈溶液100μl, 1mol/L三乙胺乙腈溶液100,混匀,室温下放置1小时后加入400正己烷,旋涡混旋器振荡1min,静置10min,取下层溶液作为供试品溶液
2006-11-04 17:06
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楼主 qulyn
qulyn
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  • 4楼
谢谢大家了。我没说清楚。我现在做的是异硫氰酸酯类药物,用氨水做衍生化试剂,在乙腈中衍生,我想把衍生物从乙睛中萃取出来,用了好多萃取试剂,似乎萃取效率都不高,正己烷根本就不行,不知道是为什么
2006-11-04 20:40
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