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[求助]Percoll法分离细胞遇到的问题

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楼主

铁杆站友

1楼

这个帖子发布于13年零327天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

我用Percoll密度梯度离心法分离胎盘细胞，但是Percoll的分层总是不好，可以看见在45％Percoll处有胎盘细胞，但是不是呈现一个圆形的盘状，而是呈絮状分布与大约25％－55％Percoll处，而且红细胞不能完全离心到下层，有没有高手指点一下。
另外想了解一下有那些因素会影响细胞在Percoll中的分层，我在制备密度梯度的时候需要注意什么问题呢？

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2006-02-28 00:39 浏览 : 2783 回复 : 11

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jilar

病理科

铁杆站友

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2楼

我也用过Percoll分离细胞，但不是胎盘细胞。根据我使用时的情况，细胞分层不明显的原因可以有以下几种：
1：细胞数量太少或者过于稀释，我取一只大鼠的颌下腺，一般将细胞稀释成1ml，然后缓慢加到3～4ml的percoll液上。
2：Percoll液配制有问题。
3：离心转数不对。太多或者太少都不会有明显的分层。
4：离心机不合适。甩桶离心机的效果要比角度离心机的效果好很多。
这是我的想法，你参考一下，具体的分离条件还要你自己摸索，文献上记载的未必适合你。

2006-02-28 09:05