接头分子

不同的TLR会触发特定的生物反应，这是因为不同的TLR招募了不同的接头分子。接头分子包括MyD88、TIRAP(MAL)、TRIF和TRAM，它们被不同的TLR招募并激活不同的信号通路(图1和图2)。MyD88是TIR家族中第一个被发现的成员，除TLR3外，所有的TLR都普遍使用MyD88，它能激活转录因子NF-κB和丝裂原激活的蛋白激酶(MAPK)来诱导炎性细胞因子。相反，TRIF被TLR3和TLR4使用，并诱导不同的途径，导致转录因子IRF3和NF-κB的激活，从而诱导I型干扰素和炎性细胞因子的产生。TRAM和TIRAP分别作为分选适配器将TRIF招募到TLR4，将MyD88招募到TLR2和TLR4。因此，TLR信号通路可以很大程度上分为MyD88依赖的通路和TRIF依赖的通路，前者驱动炎性细胞因子的诱导，后者负责诱导I型干扰素和炎性细胞因子。

MyD88依赖的途径

在它们的同源PAMP参与TLR后，MyD88招募IL-1受体相关激酶IRAK4、IRAK1、IRAK2和IRAK-M(图3)。IRAK4最初被激活，在NF-κB和MyD88下游的MAPK的激活中起着至关重要的作用。IRAK1和IRAK2是顺序激活的，NF-κB和MAPK49的强健激活需要这两个激酶的激活。IRAK的激活导致与TRAF6的相互作用，TRAF6是一种E3连接酶，催化合成与靶蛋白Lys63(K63)相连的多泛素，包括TRAF6本身和IRAK1，以及二聚体E2泛素结合酶UBC13和Uev1A。K63连接的多泛素链然后与激酶TAK1复合物的调节成分Tab2和Tab3的锌指型泛素结合域结合，激活TAK1。K63连接的多泛素链还与NEMO的泛素结合域结合，NEMO是NF-κB激活所需的IKK复合物的重要调节成分。因此，K63多泛素链可能负责招募TAK1与IKK形成复合物，从而允许TAK1通过与IKK复合物的紧密结合而磷酸化IKKβ，从而导致NF-κB通过磷酸化而激活，并随后降解IκB蛋白。由HOIL-1L和HOIP组成的线性泛素链组装复合物(HOIL-1L和HOIP)使NEMO从头到尾的线性多泛素化被证明是IKK激活的一个重要过程。

TRIF依赖的途径

TRIF依赖的途径最终导致IRF3和NF-κB24的激活(图3)。TRIF招募TRAF6并激活Tak1以激活NF-κB，很可能是通过泛素化依赖的机制，类似于MyD88依赖的途径。TRIF还通过独特的RIP同型相互作用基序招募适配器RIP1。在TLR3激动剂的刺激下，RIP1经历了K63连锁的多泛素化，这一修饰是NF-κB激活所必需的。TRANDD与RIP1结合，TRANDD缺陷细胞表现出RIP1泛素化受损，伴随着NF-κB激活的丢失，这表明TRANDD参与了TLR3下游RIP1的激活。Pellino-1是含有环状结构域的E3泛素连接酶的Pellino家族成员，Pellino-1缺乏导致RIP1泛素化和NF-κB活性的丧失，尽管依赖于MyD88的NF-κB激活正常。TRIF与TRAF6、TRADD、Pellino-1和RIP1共同形成多蛋白信号复合体，激活Tak1，进而激活NF-κB和MAPK通路。

PDCs中的TLR7和TLR9信号

PDC中的TLR7和TLR9信号通路是独特的，因为它们都需要MyD88来诱导I型干扰素(图3)。在这方面，由pDC组成性表达的IRF7与MyD88结合，并与IRAK4、TRAF6、TRAF3、IRAK1和IKKα24形成多蛋白信号复合物(图3)。在这个复合体中，IRF7被IRAK1和/或IKKα磷酸化，从复合体中解离出来，移位到细胞核中。除了需要磷酸化，IRF7的激活可能还需要依赖TRAF6和UBC13的泛素化。IRAK1、IKKα和TRAF3特异性地参与了IRF7的激活，而MyD88、IRAK4和TRAF6对IRF7和NF-κB的激活都是至关重要的。OPNi是骨桥蛋白的前体，是一种TLR9诱导蛋白，隔离在细胞质中，作为pDCs67中MyD88-IRF7复合物的组成部分。磷脂酰肌醇3-羟基激酶(PI(3)K)的药理抑制可消除IRF7的核转位。此外，抑制mTOR和p70S6K都是PI(3)K的下游靶标，破坏了TLR9和MyD88之间的相互作用，从而导致IRF7核转位受损和I型干扰素68的诱导。这些发现表明PI(3)K-mTOR途径在病毒感染过程中加速pDC产生I型干扰素。IRF5被整合到MyD88复合体中，控制IL-6和IL-12p40的诱导。IRF8缺失的pDC同时失去了TLR9介导的Ⅰ型干扰素和炎性细胞因子的诱导，NF-κB活化较少，提示IRF8与NF-κB协同调控细胞因子的诱导。

• The role of pattern-recognition receptors in innate immunity-....pdf(797.43k)