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常驻站友

71楼

proteinwang
dotfood 战友你好
我对你的正交试验设计存在一些疑问，你在进行氮源单因素分析时，设置的水平为0.05%，为什么进行正交设计时氮源水平的设置这么高呢，最低都是0.5%？你做过氮源不同水平对产素的影响吗？水平的设置很重要，有时水平的设置能够掩盖因素的影响。
此外，正交分析的结果，方差分析应该比直观分析更有可信度。

我当时的考虑是通过单因素实验选出实验的氮源、碳源，通过正交实验初步确定两者的添加量。我设置的水平跨度较大，基本上是包括一般培养基中的最大与最小水平。如果因素水平对发酵效果有影响的话，应该在方差分析中能够体现出来。我采用的是方差分析确定主影响因素，结合均值分析确定的添加量。

2006-04-01 12:36

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dotfood

常驻站友

72楼

我的理解是Plackett-Burman法中较低水平的设置是关键的，得首先保证这个水平是适合菌体生长和产物生成的。因此采用Plackett-Burman法必须得有前期的实验作为依据。不知道大家的意见是怎么样的？

2006-04-01 12:40

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guanga

入门站友

73楼

我刚接触发酵不久,有一个问题想请教各位高人:

我在做一个重组蛋白的时候,是用大肠杆菌表达的,我在摇瓶里可以表达出来.但是放到10L的发酵罐中的时候表达量反而下降了,我们考虑了各种原因以后

主要原因集中在诱导后表达的问题上,各位有什么建议啊?你们在诱导后表达的时候都如何做的啊?
是用IPTG 诱导的,诱导量也做了.

2006-04-04 15:54

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fusword

铁杆站友

74楼

感谢地盘草谈到了从摇瓶到发酵罐的放大。这两步是紧密相连的，一般做工艺优化从摇瓶开始，再逐步放大到发酵罐。但是经常会发现很多意想不到的问题，比如我在试验时一直到10L的发酵罐全部正常（我们只需要获得菌体），但在同样的条件（除溶氧没检测）放大到1吨的发酵罐后，菌体生长非常缓慢，而且发现菌体变异。做噬菌体检测证实没噬菌体，在这种情况下应该从哪些方面来考虑这个问题呢？从简单的配方、工艺条件方面应该是不好解释这种现象的。

2006-05-22 12:42

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