Hello，大家好

      小鼠眼眶采血是一种较为常用的采血方式，相较于小鼠剪尾及割尾取血的方式，有明显的优势：1. 采血量更大；2. 可以实现连续采血； 3. 不易出现组织污染。而相较于采血量较大的心脏穿刺采血、颈静脉采血、腔静脉采血等方式，眼眶采血对小鼠损伤更小，采血后小鼠可以存活，进行后续的实验。（个人经验总结）

       最近需要反复给小鼠眼眶采血，在网上查找相关资料以后，发现这方面的教程和资料都有限，加上八只最近觉得自己的小鼠24h内多次眼眶采血的成功率和熟练度都还可以(●ↀωↀ●)✧，想着也许可以给大家录制一个视频教程(●ↀωↀ●)✧～

附上一张图方便大家理解我们的进针（玻璃毛细采血管）的位置和角度：

       实际操中，并不建议上图中采取斜切过的毛细采血管的方式，这样容易损伤小鼠。我个人是在将玻璃毛细采血管掰成所需的长度以后，采用平整的一端进入小鼠眼眶。减少对小鼠的损伤，也避免了玻璃碎片残留在小鼠组织中。

【最后附上Tips】

1. 麻醉程度对能否顺利采集到血液起了非常重要的作用，密切关注小鼠麻醉状态，确保麻醉充分但不致死，保证后续操作顺利、减轻小鼠痛苦；

2. 小鼠眶后静脉窦位置较浅（相较于大鼠），不用费什么力气就可以采血，进针过程应缓慢而轻柔；

3. 采集血液时可将小鼠倒置、适度挤压小鼠胸部，加速血液流出，每次采血不宜超过100μL（我个人在24h内采集6-7个采血点，每次50μL左右），单次采血过多将影响后续采血量；

4. 玻璃采血管易导致凝血，应做好抗凝工作，我个人是“三重抗凝”：抗凝处理过的采血管 + 肝素润洗烘干的ep管+ep管底部加5μL肝素；

5. 小鼠麻醉状态下及采血过程中体温较低，注意给小鼠保温（使用垫料+调节室温）；

6. 多练习，平稳而熟练的操作可以减轻小鼠的痛苦；7. 实验过程中务必善待小鼠，毕竟连续眼眶采血会对小鼠造成一定的损伤。

      因为我也是根据各种文字和图像资料，加上反复实践而摸索出以上的操作，所以也不敢担保该视频完全正确。与其说是教程，不如说是个人实验操作的一份记录吧～如果当中有什么操作上的失误，欢迎大家评论区指正呀。

非常感谢🙇‍♀️！我还没有试过自制抗凝管，自制的话，润洗过的抗凝管需要烘干吗？下次尝试一下，因为自制的话似乎可以节约很多成本(*￣︶￣)