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蛋白质和糖学

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论坛首页  >  蛋白质和糖学技术讨论版   >  Western Blot/IP
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小白来问一下western时为什么二抗要加奶粉?

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楼主 毒理懵圈小白
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      我知道一抗之前用奶粉封闭是为了防止一抗结合到膜上,但是为什么敷二抗的时候也要加奶粉呢?直接用TBST稀释不行吗?

    另外为什么有时候发光不亮,回来重新敷一抗,洗完膜,二抗的时候降低一点奶粉的浓度,再去发光就会亮了呢?有点不明白

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2019-10-10 13:16 浏览 : 1727 回复 : 4
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二抗浓度越低效果越好,那你就不加奶粉了呗,我们实验室敷二抗不加奶粉


2019-10-11 18:37 来自 iPhone/iPad客户端
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dxy_e4dedkfw

二抗浓度越低效果越好,那你就不加奶粉了呗,我们实验室敷二抗不加奶粉



谢谢~另外再问一下出现杂带跟封闭关系大吗?是不是主要看一抗特异性够不够
2019-10-11 19:24 来自 Android客户端
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二抗+奶粉可以降低背景


2019-10-13 02:14 来自 Android客户端
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