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【求助】Western blot的条带中间淡的几乎断掉（或哑铃状、纺锤状）的样子是什么原因？要怎么改进呢？

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楼主

Linda_dentist

口腔修复科

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1楼

这个帖子发布于3年零120天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。

问题已解决悬赏丁当:2

做的是LC3B、p62和Beclin1的WB，但是不管做哪个指标，条带都会呈现中间明显比两头淡，有的几乎看起来像是断掉一般，要调整曝光强度，才勉强连起来，而且就算连起来了也会有明显哑铃状，大家有遇到过这种问题吗？是什么原因？要怎么改进呢？？？

ps：图上是同样的样本上样的，只是从左到右的上样量依次减少，分别为40、35、30、25、20、15、10、5ug

电泳：90v 30min；120v 1h；

转膜：110v 1h；

封闭用碧云天封闭液；

抗体用abcam；

凝胶用10%和12%的

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2017-10-30 16:35 浏览 : 9196 回复 : 12

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Linda339656099 编辑于 2017-10-30 16:40

• 11岁女孩患水痘医院误开死亡证明

楼主

Linda_dentist

口腔修复科

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2楼

电泳：90v 30min；120v 1h；

转膜：110v 1h；

封闭用碧云天封闭液；

抗体用abcam；

2017-10-30 16:37

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• 法医学专业为何仅限男生？？？有网友爆料华西法医转专业只招男生

楼主

Linda_dentist

口腔修复科

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4楼

秋田雨雀
1.胶凝固后不均一，分离胶放1.5h
2.样品中有没有杂质

样品我是裂解后4度孵育40min，之后4度 12000g 离心5min，然后取上清液，加Loading buffer后煮沸，分装后-80度保存。。

2017-10-30 20:38

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• 我到底要不要读这个博士？

楼主

Linda_dentist

口腔修复科

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7楼

xuqingyou
细胞还是组织？上样浓度如何？

上的肝组织，试过上样量40、35、30、25、20、15、5ug，都是这样的情况

2017-11-04 08:54

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• 什么是藏象理论？

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