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PCR技术

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论坛首页  >  PCR技术讨论版   >  电泳\Blot
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琼脂糖凝胶电泳条带异常，有没有人遇到过？

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楼主 dealdream
dealdream
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这个帖子发布于3年零94天前，其中的信息可能已发生改变或有所发展。
问题已关闭悬赏丁当:5

近期的琼脂糖凝胶电泳一直不正常，条带扭曲（如图），有些时候电泳点的100bp DNA Ladder（TAKARA）的1.5K、1K、900bp等较大片段都在胶上看不到。目前已经排查了多个原因，更换了电泳缓冲液、更换了进口的琼脂糖、也用了一次别的电泳仪测试了，结果均未得到改善。在排查过程中，用Loading Buffer将Marker进行2倍稀释后电泳的结果会好些，条带清晰了一点。

排查和试验过程采用的电泳条件及设备如下：

1）电泳仪：北京六一产DYCP-32B型琼脂糖水平电泳仪(中号)

2）电源：北京六一产DYY-6D型电脑三恒多用电泳仪电源

3）电泳条件：恒流电泳，电流100mA（过程中显示电压130V，功率是13W），电泳时间大约45-60分钟。

还望战友帮助！！
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2017-10-17 16:14 浏览 : 7992 回复 : 10
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楼主 dealdream
dealdream
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LavenderNB1O

你的琼脂糖凝胶做的怎么样，自己评价一下，你的第一张图marker左右都是倾斜的，感觉上你电泳的时候胶是不是歪了，所以你所有的结果都应该是倾斜的，但是你的marker条带不均一，所以感觉你的凝胶做的视乎是有点问题的

感谢您的回复！胶是1.5%的（1.5g琼脂糖+100ml 1xTAE），冷凝2-3h，应该是没什么问题的。溶胶也是正常的，很透亮，看不到未溶解的颗粒。
2017-10-18 08:48
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楼主 dealdream
dealdream
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  • 5楼
医生hrr

神奇了 重点考虑凝胶不好 怎么配的胶？等待多久使用？

感谢您的回复！胶是1.5%的（1.5g琼脂糖+100ml 1xTAE），冷凝2-3h，应该是没什么问题的。溶胶也是正常的，很透亮，看不到未溶解的颗粒。
2017-10-18 08:53
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楼主 dealdream
dealdream
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LavenderNB1O

我不会制作琼脂糖凝胶的时候电泳结果就是这样子的，结果很奇怪。多煮一会儿就好了

好的，谢谢您的回复~~^_^
2017-10-18 09:43
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